METODE EKSTRAKSI AMPLICON DARI GEL PADA HASIL RUNNING ELEKTROFERESIS DNA

download

“AXYGEN GEL EXTRACTION KIT”

1.       Gel yang mengandung amplicon dipotong dan ditimbang

2.       Gel ditambahkan dengan capture buffer (100 mg gel + 100 μL buffer)

3.       Gel diinkubasi suhu 60oC sampai larut (di vortex pelan) ± 10-15 menit

4.       Gel yang sudah cair dimasukkan pada column yang dipasang collection tube

5.       Sentrifuse 13.000 rpm, 30 detik suhu ruang (buang supernatant pada collection tube)

6.       Column ditambah wash buffer (7 ml ethanol absolute + 3 ml TE buffer)

7.       Sentrifuge 13.000rpm, 30 detik, suhu ruang

8.       Buang larutan dalam collection tube,

9.       Pasang kembali collection tube, lalu sentrifuge 13.000rpm, 30 detik suhu ruang untuk menghilangkan sisa ethanol

10.   Pasang column pada tabung 1,5 ml dan pada column ditambah 20-30 μL ddH2O

11.   Sentrufige 13.000rpm, 30 detik, suhu ruang

12.   Simpan hasil purifikasi pada – 20oC

NB: column bisa digunakan kembali asalkan gel yang dipotong dari sampel yang sama., column kalau ingin digunakan kembali bisa disimpan pada suhu 4oC.

 

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *

You may use these HTML tags and attributes: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>